登 记 号：2006402047
研究起止2000年12月—
年限：2005年12月
计划来源：国家计划
推荐部门：中国科学院
联系单位：中国科学院南海
洋研究所
地址：广州市新港西路
164号
邮编：510301
联 系 人：李丽璇
电话：020-89023122

针对海水鱼类养殖业中弧菌病的危害问题，本课题采用亚单位疫苗、偶联亚单位疫苗等现代生物技术，开展了病原弧菌LPS、外毒素、LPS与外毒素偶联亚单位疫苗等研究，并取得了重要进展。
1.开展了最小弧菌LPS-毒素二价苗的制备研究。最小弧菌LPS的提取采用酚水法进行；最小弧菌外毒素的提纯采用硫酸铵分级盐析及Sephadex-G100层析等生化方法进行；采用EDC法进行LPS与外毒素的偶联。
2.开展了LPS、毒素苗、LPS-毒素二价苗对军曹鱼和真鲷的免疫保护工作，选择了浸泡的免疫方式进行免疫。初次免疫后，LPS对真鲷及军曹鱼苗的免疫保护率均达70%；毒素苗对真鲷的免疫保护率为60%，对军曹鱼苗的免疫保护率达80%；LPS-毒素二价苗对真鲷的免疫保护率为80%，对军曹鱼苗的免疫保护率为75%。强化免疫后，LPS对真鲷的免疫保护率最高可达82%，对军曹鱼的免疫保护率达78%；毒素苗对真鲷的免疫保护率为75%，对军曹鱼的免疫保护率达85%；LPS-毒素二价苗对真鲷的免疫保护率为88%，LPS-毒素二价苗对军曹鱼的免疫保护率为86%。在生长方面，实验组与对照组差别不大，这说明免疫过程对鱼体的生长没太大影响。
3.开展了毒素苗工厂化生产工艺研究，初步探讨了摇床培养最小弧菌的最佳培养条件。温度对菌体数量及毒素的产生有显著影响，在30℃培养时产量最高；改良海水营养培养基与普通海水营养培养基相比，更有利于毒素的产生，毒素产量可提高1倍；当起始pH在弱碱性环境（7.2左右）时，毒素产量最高；振荡通气能极大地促进毒素的产生，显著提高其产量；毒素的产量随着培养时间的延长而逐步增加,到36小时即可达到最高水平,并维持至72小时。
4.开展了最小弧菌毒素苗的稳定性测定（物理性状、无病原污染、保存条件及保存期等）。
5.该课题国内发表论著9篇；申请发明专利4项。